En la última sesión dedicada al proyecto ensayamos la posible actividad antimicrobiana de doce extractos de plantas frente a Bacillus megaterium y Escherichia coli. Recordemos que para ello inoculábamos 100 microlitros de un cultivo líquido de estas bacterias en 5 ml de agar semisólido (TSB + agar 0,6%) y lo depositábamos sobre placas con medio TSA. Con ello conseguiríamos un crecimiento en césped sobre toda la placa, es decir, los microorganismos formarían una capa continua sobre el agar. Una vez hecho lo anterior, disponíamos los discos de papel impregnado en los extractos vegetales obtenidos tal y como indicábamos en la entrada anterior.
Los resultados los podemos ver en la imagen que se adjunta. Para extraer las conclusiones oportunas debemos estudiar con cuidado el crecimiento bacteriano en la proximidad de los distintos discos y observar diferencias entre ellos.
¿Hay algo llamativo en las placas? ¿Hemos encontrado algún efecto antimicrobiano en cualquiera de nuestros extractos? ¿En cuál o cuáles? ¿Cómo podríamos dar una medida de la actividad de los extractos de nuestras plantas? Esto último es importante para comparar la actividad de distintos extractos o en el caso de que ensayemos distintas concentraciones de los mismos.
En las sesiones de introducción al proyecto aprendimos cómo buscar información en bases de datos de publicaciones científicas. ¿Se ha descrito en la bibliografía actividad antimicrobiana en la planta o plantas con las que estamos trabajando? Para ello es importante tener en cuenta que es mejor que le preguntemos a la base de datos con el nombre científico de la planta. And not only in Spanish!
Como es habitual, aunque os lo recuerdo para los que os habéis incorporado en este curso al instituto, las respuestas a todas estas preguntas deben hacerse como comentarios a esta entrada del blog, aparte de en las notas de nuestros cuadernos. Es importante también incluir nuestras impresiones de los experimentos y nuevas propuestas que completen nuestro trabajo. Todo ello nos será útil para la elaboración del artículo final.
Después de la práctica de la semana pasada, en la cual hicimos todo lo que está escrito en el principio de este comentario de forma introductoria, hemos obtenido al fin los resultados.
ResponderEliminarDe las 6 placas de cultivo bacteriano con esencia que preparamos, en 3 de ellas hemos probado con la bacteria E. Coli y en otras 3 de ellas hemos probado con B. Megaterium y éstos son los resultados concluyentes:
- En la primera placa (donde pusimos: Rosal,Salvia,Santolina y Eucalipto):
-el disco impregnado de Rosal no muestra actividad antimicrobiana ante E.Coli
-el disco impregnado en Salvia muestra una clara evidencia de presencia de actividad antimicrobiana, ya que podemos apreciar cómo E.Coli es incapaz de crecer y expandirse en la zona de la periferia del disco con extracto, eso conlleva a que nos inclinemos a estudiar más a fondo las propiedades de esta planta e intentar ver si podríamos llevar más lejos el uso de ésta como medicamento antimicrobiano contra las patologías asociadas a E.Coli
-el disco impregnado en Santolina por el contrario no muestra actividad antimicrobiana
-En la segunda placa encontramos(Perejil,Madroño,Ortiga y Shiso):
-el disco impregnado en Perejil tampoco muestra actividad antimicrobiana.
-el disco impregnado en Madroño tampoco muestra actividad antimicrobiana.
-el disco impregnado en Ortiga tampoco muestra actividad antimicrobiana.
-el disco impregnado en Shiso tampoco muestra actividad antimicrobiana.
-En la tercera encontramos(Naranja,Olivo,Limón y Lavanda)
-el disco impregnado en Naranja no muestra actividad antimicrobiana
-el disco impregnado en Olivo al igual que la Naranja tampoco
-el disco impregnado en Lavanda sigue al igual que sus compañeros de placa, sin actividad animicrobiana
-el disco impregnado en Limón parece ir a la moda con sus compañeros, no presentar actividad antimicrobiana
Debido a que no se puede observar con detalle cada disco impregnado de extracto, considero la información que he dado como ''no confirmada'' o al menos con poca certeza por ahora.
Rectifico el comentario que previamente envié:
EliminarEl extracto de Salvia no es el único que muestra actividad antimicrobiana ( pero si el que cuenta con más evidencia de ello), ya que, en la misma placa de Petri los discos con extractos de Eucalipto y Rosal, también presentan actividad antimicrobiana aunque en menor medida con respecto a disco impregnado en extracto de Salvia.
Ésto nos amplía el abanico de posibilidades de poder estudiar la actividad antimicrobiana de más plantas.
Respondiendo a la pregunta de cómo podríamos medir la actividad antimicrobiana: propongo medir el diámetro del círculo en donde el extracto no deja que crezcan las bacterias y crear una comparativa entre estas medidas.
Y en respuesta a la última pregunta:
- Buscando información sobre la actividad antimicrobiana.
- Eucalipto presenta actividad Antimicrobiana: http://www.phcogres.com/article.asp?issn=0253-7613;year=2004;volume=36;issue=2;spage=93;epage=94;aulast=Trivedi
- Salvia presenta actividad Antimicrobiana: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0308814605009076
- Rosal presenta actividad antimicrobiana : https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.1080/09637480601121318
Una vez haber visto cómo han crecido Bm y Ec en un medio de cultivo con extractos de plantas que tal vez podían tener efectos antimicrobianos podemos sacar varias conclusiones.
ResponderEliminarVemos que en general las bacterias no han tenido ningún problema a la hora de crecer en varias excepciones. Tenemos que tener en cuenta que Bm crece muchísimo más que Ec y por eso también podemos encontrar mayor número de colonias en las placas superiores.
El primer extracto que encontramos con mayor efectividad a simple vista es el de Salvia en Bm. Podemos ver claramente el halo alrededor del disco empapado en extracto sin ninguna bacteria.
Sin embargo en las demás placas con los demás extractos no se pueden ver tan claramente ese halo alrededor del disco sin bacterias. Tal vez si mirásemos a través del microscopio podríamos encontrar que crecen un poco menos que en el resto de la placa.
Pero nos interesan las plantas con efecto al 100% para seguir estudiándolas y por ello nos enfocaremos en la salvia.
Aunque sólo hayamos encontrado efecto en esta planta, no quiere decir que juntando extractos de varias plantas diferentes encontremos también un efecto antimicrobiano. Puede ser alguno de los próximos experimentos, ver si combinando plantas podemos encontrar también estos efectos y ayudas contra las bacterias.
Una vez analizadas más de cerca todas las placas encontramos que realmente no hay mucha actividad antimicrobiana a rasgos generales. Pero parándonos más de cerca en cada placa encontramos que:
EliminarEn las placas de Bm vemos que el rosal, el eucalipto, la lavanda y el olivo tienen dicha actividad, no tan notable como en podemos observar en Salvia pero sí que hay una diferencia en el crecimiento de bacterias alrededor de estos discos.
En cuanto a Ec nos pasa igual pero con el rosal y el eucalipto.
Para ver si hemos hecho algún descubrimiento nuevo, buscamos los análisis que ya se han hecho de estas plantas y sus características con lo que nos encontramos con:
Rosal: Ya se ha registrado actividad antimicrobiana. https://scholar.google.es/scholar?hl=es&as_sdt=0%2C5&as_vis=1&q=rose+antimicrobial+agents&oq=rose+antimi#d=gs_qabs&u=%23p%3D1vD6uKLcMmQJ
Eucalipto: Ya se ha registrado actividad antimicrobiana. Además de haber hecho ya experimentos en Ec.
https://scholar.google.es/scholar?hl=es&as_sdt=0%2C5&as_vis=1&q=actividad+antimicrobiana+eucalipto&btnG=#d=gs_qabs&u=%23p%3D91GaUh0YHjsJ
Lavanda: No tiene actividad antimicrobiana significativa, como hemos podido observar también nuestras bacterias.
https://scholar.google.es/scholar?hl=es&as_sdt=0%2C5&as_vis=1&q=actividad+antimicrobiana+lavanda&btnG=#d=gs_qabs&u=%23p%3DbMiAsoAns60J
Olivo: Ya se ha registrado actividad antimicrobiana en Pseudomonas https://scholar.google.es/scholar?hl=es&as_sdt=0%2C5&as_vis=1&q=actividad+antimicrobiana+olivo&btnG=#d=gs_qabs&u=%23p%3DD69fn_bQwbcJ
Salvia: Ya se ha registrado actividad antimicrobiana. https://scholar.google.es/scholar?hl=es&as_sdt=0%2C5&as_vis=1&q=actividad+antimicrobiana+Salvia&btnG=#d=gs_qabs&u=%23p%3DP2HmWueBdwAJ
Antonio, has utilizado Google académico (scholar) para buscar bibliografía, pero tal y como me envías las referencias no puedo acceder a ellas. Accedo a la lista que tu has consultado. Debes pinchar en el título del trabajo y te enviará a un resumen (abstract). Si copias del navegador la dirección y la pegas entonces yo podré acceder y valorar tus referencias.
EliminarEs importante que además vayáis tomando notas de los artículos. Debemos ver coincidencias o discrepancias en la actividad con nuestras plantas. Ver si los extractos se han preparado de la misma forma. Estos serán algunos de los puntos que utilizaremos en la discusión de nuestros articulo.
Otra cosa que tenéis que ir pensando en en posibles utilidades de nuestros extractos. De esto también nos puede dar idea la bibliografía.
En cualquier caso, muy bien tu trabajo.
Corrección de los enlaces donde encontramos información de la actividad antimicrobiana de cada extracto de planta:
EliminarRosal: https://academic.oup.com/femsle/article/185/2/135/594491
Eucalipto: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1609-91172019000200042&script=sci_arttext&tlng=en
Lavanda: Es el resumen donde podemos encontrar la información, además de la del tomillo (planta no usada por nosotros) https://riunet.upv.es/handle/10251/62057
Olivo: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=2962760
Salvia: https://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/farma/article/view/3510
Las placas tienen diferentes extractos de plantas y en la imagen se aprecian varias plantas, algunas, con efecto antimicrobiano.
ResponderEliminarLa salvia es su principal referente creo que en base a los resultados deberíamos usar la salvia como referencia antimicrobiana. Sautotina también se aprecia algo de activada pero a simple vista no distingo nada mas.
En conclusión la salvia puede ser nuestra planta guia en este proyecto pero habrá que buscar mas
Nuño, las fotos que incluimos de las placas son una herramienta para que siempre tengamos la referencia de la actividad que presentan nuestros extractos o que no presentan. Lo importante es ver las placas en el laboratorio, y ya sabéis que, además de verlas en clase, las tenéis disponibles para que las leáis las veces que os haga falta.
EliminarEs una buena idea tomar como referencia antimicrobiana un extracto o una planta, como dices para la salvia, pero fíjate que no tiene actividad apreciable frente a E. coli. Sí que se podía ver cuál de todos los extractos tiene mayor actividad y tomarlo como referencia. Mira la entrada siguiente en el blog y valora la actividad de los extractos de corteza de granada; aquí sí que hay actividad frente a ambas bacterias.
Esto de la referencia que propones es algo parecido es lo que hacen los investigadores cuando hacen estos ensayos, comparan con antibióticos comerciales. Quizá, cuando tengamos determinados qué extractos presentan actividad Manolo pueda traernos algunos discos impregnados en antibióticos y podamos comparar la actividad con respecto a estos. Pero aún no habéis contestado a una pregunta. Y es cómo podemos medir y comparar la actividad antimicrobiana de los extractos.
A la pregunta como podemos medir medir y comparar la actividad antimicrobiana de los extractos, supongo que el sistema de medición será la superficie del halo del efecto antimicrobiano. Y comparalos será similar a comparar vectores(estos graficamente y con un valor numerico) y los halos o efectos graficamente (viendolo a simple visata) o con el valor numerico de la superficie.
EliminarComo podemos ver en las seis placas han crecido las bacterias E. coli y B. megaterium sin problemas, exceptuando los lugares donde no hay agar y en la placa de B. megaterium donde esta bacteria no ha podido crecer alrededor de la salvia, a si que todo apunta a que esta planta tiene actividad antimicrobiana con B. megaterium. Para ver la medida de la actividad de la salvia podríamos preparar otras placas en las que el trozo de papel impregnado con el extracto fuera más grande o más pequeño, después compararíamos este tamaño con la zona donde no logra crecer B. megaterium, y así se vería si al depositar mucho más extracto tiene un efecto muy grande en el crecimiento de la bacteria, por ejemplo.
ResponderEliminarEn la base de datos que tomamos al comenzar el proyecto tenemos datos sobre la actividad antimicrobiana de la ortiga, eucalipto, salvia, santonina y de la lavanda.
Después de obtener estos resultados deberíamos seguir experimentando con B. megaterium y la salvia y también estaría bien poder probar la actividad antimicrobiana de estas plantas en otras bacterias, con las que sea más cómodo experimentar para empezar.
De las placas preparadas en la última sesión podemos analizar que a primera vista no se ve una gran actividad antimicrobiana frente a las bacterias E. Coli y Bacillus megaterium en las placas. Sin embargo, podemos observar que la salvia, el rosal y el eucalipto tienen actividad antimicrobiana frente al Bacillus megaterium, y que el rosal, el eucalipto y el perejil tienen, también, frente al Escherechia coli. La salvia es la que ha presentado una mayor actividad frente al B. megaterium, por lo que deberíamos centrarnos más en ella. En las demás placas, no se observa con claridad o a primera vista actividad antimicrobiana por lo que debe ser insignificativa o no tener frente a estas bacterias, aunque no podemos decartar que tengan frente a otras.
ResponderEliminarPodríamos dar una medida mediante el área de la placa, que hay alrededor del disco con el estrato, en el que se ha bloqueado el crecimiento de la bacteria, teniendo en cuenta la intensidad de dicho bloqueo.
Respecto a la bibliografía de las plantas en las que hemos encontrado actividad antimicrobiana:
Rosal: está demostrado que tiene actividad antimicrobiana, solo que no sé si el estrato es de la misma especie que la del artículo
https://www.fitoterapia.net/publicaciones/hemeroteca/rosa-silvestre-beneficios-actividad-antimicrobiana-1747.html
Salvia sp.: está demostrado que tiene actividad antimicrobiana y que no presenta un efecto significativo sobre Escherichia coli y Candida tropicalis
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0325754116300487
Eucalyptus globulus: está demostrado en varios artículos su actividad antimicrobiana.
https://repositorio.upeu.edu.pe/handle/UPEU/1711
Perejil: está demostrada su actividad antimicrobiana.
https://pdfs.semanticscholar.org/0b19/5db53ec905f73c29db35e7e22101b49e1d92.pdf
Dada la bibliografía sería interesente pobrar la actividad antimicrobiana de tanto las plantas que han resultado aparentemente fallidas como de las que no en otras bacterias.
Mónica, excelente comentario. Una buena descripción de los resultados y una propuesta interesante para medir la actividad antibacteriana, aunque medir áreas de inhibición puede resultar complicado aparte de que habría que hacer cálculos.
EliminarY muy bien las referencias bibliográficas. Has cogido muy bien la idea de lo que se pedía en esta entrada.
Buena búsqueda de información Mónica. Efectivamente has encontrado un comportamiento de Salvia que se puede aproximar a la nuestra. No se trata de la misma especie, pero sí que la que describe tu artículo es efectiva frente a bacterias Gram positivas (es el caso de nuestro Bacillus megaterium) y negativa frente a E. coli. Interesante referencia para discutir finalmente nuestros resultados.
ResponderEliminarEste año estamos realizando un proyecto de investigación sobre la actividad antimicrobiana de las plantas en ciertas bacterias,para ello hemos llevado a cabo lo explicado en el blog esperando resultados que ya hemos obtenido sobre algunas de las plantas :
ResponderEliminarEn tres placas hemos usado Bacillus megateriun en la que destaca la Salvia alrededor de la cual esta bacteria no crece y muy poco notable observamos crecimiento,pero menos, alrededor de la sentolina.
En los demás estractos no se observa ningún roal en el que no crezca bacteria demostrando así su actividad antimicrobiana.
Las otras tres placas son con la bacteria Escherichia coli en las que hemos colocado los mismos estractos que en bacillus y en la que los resultados no han sido los mismos ya que no se aprecia ninguna planta que tenga actividad antimicrobiana en esta bacteria.
Como hemos encontrado actividad antimicrobiana en la salvia deberíamos centrarnos en esta con otras bacterias e incluso repetir el experimento con la sentolina y otros estractos de otras plantas distintas a estas con las que hemos trabajado.
Julia Martínez
Efectivamente, con nuestros experimentos solo podemos afirmar que nuestros extractos tienen o no tienen actividad frente a dos estirpes concretas de Bacillus megaterium y Escherichia coli. Para valorar mejor la actividad sería recomendable probar frente a otras bacterias. Probablemente lo haremos.
EliminarComo podemos ver en las seis placas la mayor parte de las plantas no han mostrado actividad antimicrobiana. Pero hay excepciones: en B.megaterium se puede ver que el rosal, el eucalipto y sobretodo la salvia (que es la planta que más resistencia ha tenido a nuestros microorganismos) han conseguido lograr que esta bacteria no crezca a su alrededor. En cuanto a E.coli, podemos ver que el rosal, el eucalipto y el madroño han presentado resistencia ante esta bacteria, debido a que esta no ha podido crecer a su alrededor. Para ver la medida de la actividad de las plantas que han salido exitosas en el experimento podríamos preparar otras placas en las que el trozo de papel impregnado con el extracto fuera más grande o más pequeño, después compararíamos este tamaño con la zona donde no logra crecer B.megaterium o E.coli, y así se vería si al depositar mucho más extracto tiene un efecto muy grande en el crecimiento de la bacteria, por ejemplo.
ResponderEliminarLa actividad antimicrobiana que he encontrado de las plantas que la han presentado, es la siguiente:
Rosal: Presenta actividad antimicrobiana, que puede ser beneficiosa para nuestro organismo.
https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=3138815
Salvia: Tiene actividad antimicrobiana.
https://pdfs.semanticscholar.org/dc53/3eb026c7e48d73ba21cc52a31288eab82bea.pdf
Eucalipto: Este artículo corrobora que esta planta tiene actividad antimicrobiana frente a E.coli
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S1609-91172019000200042&script=sci_arttext
Madroño: Tiene actividad antimicrobiana
https://www.medigraphic.com/pdfs/revcubfar/rcf-2015/rcf151n.pdf
Después de obtener estos resultados deberíamos seguir experimentando con las plantas que han presentado actividad antimicrobiana, pero sobretodo con la salvia y B.megaterium y también estaría bien poder probar la actividad antimicrobiana de estas plantas en otras bacterias, con las que sea más cómodo experimentar.
Buen comentario, Pablo. Buenas propuestas bibliográficas. Hay una pregunta a la que no has respondido, y es a cómo podemos valorar y comparar los efectos antimicrobianos de los distintos extractos. En el artículo sobre la Salvia, tienes una posible respuesta; mira como los autores describen cómo miden la actividad (aunque luego no compares con el antibiótico de referencia, creo que era ac. nalidíxico).
ResponderEliminarDebes tener cuidado con los nombres coloquiales, pues nos pueden llevar a error. Es mejor utilizar los nombres científicos; por ejemplo las rosas que estudiamos pertenecen al género Rosa; sin embargo no tienen nada que ver con la rosa de Jericó, es una especie distinta.
Ve tomando notas de lo que proponen estos artículos ya que nos harán falta para discutir nuestros resultados. Como mínimo debemos comparar la actividad que encontramos o no encontramos con la descrita en la bibliografía. Otra cosa importante es que si se describe actividad y nosotros no la hemos encontrado, ver cómo la han probado, por si fuese posible ensayar otra forma de extracción o de preparación. Pero como te digo, muy bien tu comentario.
En este nuevo experimento hemos intentado comprobar si algunas de las plantas que hemos elegido tienen actividad antimicrobiano.
ResponderEliminarPara ello hemos elegido dos de las bacterias que ya usamos el año pasado: Bacillus megaterium y Escherichia coli.
En la primera observamos que la Salvia es la primera y clara candidata aparte del eucalipto y el rosal que no se aprecian muy bien. Además al ver las placas en clase me surgió la duda de si en el olivo y la lavanda cabría la posibilidad de que haya un pequeño halo a su alrededor donde no habrían crecido bacterias.
En Escherichia coli sin embargo no se aprecia bien si en la Salvia hay halo o no al contrario que en B. megaterium que se claro. El eucalipto y el rosal están más o menos igual.
Después de observar estos resultados podemos llegar a la conclusión de que deberíamos continuar investigando la Salvia, el Rosal y el Eucalipto principalmente.
Sería interesante observar el crecimiento en otra bacteria más ya que el cambio entre estas dos es bastante, quizás nos aclararía las dudas que tenemos.
Además podríamos incrementar la cantidad de extracto o el tamaño del disco para observar el crecimiento más fácilmente, ya que al ser tan pequeños por la cantidad de plantas que hemos probado en una misma placa apenas se aprecia.
En cuanto a si estas plantas tienen actividad microbiana yo he encontrado que:
Salvia: Se ha descubierto que sí tiene
https://scholar.google.es/scholar?q=salvia+officinalis+antimicrobial+activity&hl=es&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart#d=gs_qabs&u=%23p%3DKHfi_dr4REcJ
Eucalipto: Se ha descubierto que sí tiene
https://scholar.google.es/scholar?q=eucalyptus+antimicrobial+activity&hl=es&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart#d=gs_qabs&u=%23p%3DBDevgjvwZwwJ
Rosal: Se ha descubierto que sí tiene
https://scholar.google.es/scholar?q=rosa+actividad+antimicrobiana&hl=es&as_sdt=0&as_vis=1&oi=scholart#d=gs_qabs&u=%23p%3Dfw2-v_lCuZYJ
En conclusión, aunque en los extractos más claros ya se haya descubierto que sí tienen actividad antimicrobiana, sería interesante seguir investigando, sobre todo las demás plantas.
En los resultados obtenidos vemos que no todas las plantas muestran actividad antimicrobiana. Frente a Bacillus megaterium solo la salvia, el eucalipto y el rosal muestran actividad, siendo la más evidente la de salvia. Mientras que el rosal, el eucalipto y el perejil presentan actividad frente a Escherichia coli.
ResponderEliminarEucalyptus: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3609378/#__ffn_sectitle
Para medir la actividad antimicrobiana de las plantas podríamos medir el diámetro de la zona donde las bacterias no han crecido alrededor de los discos.
En nuestra ultima sesión se han preparado seis placas con medio de cultivo, en las que se dejaron discos empapados con extracto de las plantas seleccionadas en clases anteriores, posteriormente se a introducido en tres placas la bacteria Bacillus megaterium y en las tres restantes se introdujo Escherichia coli esto con el objetivo de ver cual de nuestras plantas contiene mas capacidad antimicrobiana. En las tres primeras placas ( Bacillus megaterium ) no se aprecia casi actividad microbiana a excepción del extracto de la Salvia (Salvia officinalis) y en menor medida el extracto del Rosal (Rosa). En las tres placas de (Escherichia coli) es casi imperceptible la actividad antimicrobiana pero se puede observar algo alrededor de los extractos de Rosal (rosa) y del estrato de Eucalipto (Eucalyptus).
ResponderEliminarComo conclusión en este primer experimento no se han obtenido pruebas suficientes para descartar o aprobar alguna planta, así que se deberían hacer otros experimentos diferentes para obtener otros puntos de vista y poder sacar conclusiones con mas precisión y certeza.
Naomi Vargas
Bien, Naomi. Una salvedad; no estoy seguro de que la especie de salvia del huerto sea Salvia officinalis; es probable, pero hay otras especies. Nos lo tendrá que confirmar Luis Quesada, el profesor responsable del huerto.
EliminarPor otro lado, estoy de acuerdo contigo en que debemos hacer más experimentos. Pero nos gustaría conocer vuestras propuestas; es decir, qué os parece interesante que hagamos con nuestros extractos y nuestras bacterias. Si echáis un vistazo a la literatura existente sobre el tema seguro que os llega la inspiración. Así que ánimo, espero nuevos comentarios tuyos.
Muy bien Manal. Es una buena medida de la actividad; así podemos comparar la actividad de unos extractos con otros.
ResponderEliminarPor la imagen no parece muy claro que haya actividad del perejil frente a E. coli; a mi me da la impresión de que más que un halo de inhibición lo que hay es un sobrecrecimiento de bacterias que probablemente contaminaran el extracto de perejil, o quizá se contaminó el disco. En cualquier caso, lo importante es ver las placas y están en el laboratorio y a vuestra disposición.
Hemos realizado un experimento en el cual queremos saber si unas plantas tienen propiedades antimicrobianas con respecto a varias bacterias, tras realizar el experimento hemos obtenido estos resultados.
ResponderEliminar(Las antimicrobianas tienen un circulo alrededor en el que se muestra que no ha crecido la bacteria)
En estas placas podemos identificar como han crecido determinadas bacterias como: bacillus megaterium y e coli y en diversos tipos de plantas, algunas de ellas con propiedades antibacterianas.
Hemos observado en una minoria de placas tanto de bacillus y de e coli,en las que las plantas proporcionadas no tienen propiedades antimicrobianas, en cambio en una gran mayoria de placas si que hay porpiedades:
En las de bacillus el rosal, la salvia y el eucalipto.
En las de e coli, el rosal , el eucalipto, el perejil y la ortiga
El tamaño del circulo que nos muestra si son antibacterianas o no, según la planta es mas o menos grande, y no me queda claro el por que ya que habria que investigar más a fondo, y seria interesante utilizar otras bacterias distintas.
VICTOR MANZANO GUERRERO
Muy bien, Víctor. Efectivamente se aprecia actividad antimicrobiana frente a Bacillus megaterium, en Salvia, rosal y eucalipto (por orden de actividad). Con respecto a E. coli, yo veo sólo el rosal y en eucalipto. Es importante que veamos las placas y que realmente sobre ellas, valoremos la actividad. Las fotos valen para que recordemos las imágenes y tengamos referencias para estudios posteriores, pero la información siempre es menos fiable que las placas reales.
EliminarY efectivamente, sería interesante ampliar el estudio a otras bacterias. De hecho una propuesta de Manuel Espinosa es que ensayemos la actividad frente a algunas bacterias que afectan a plantas.
Ánimo y adelante, que vais trabajando bastante bien.
Podemos observar que las bacterias B. Megaterium y E. Coli han crecido el todas las placas, sin embargo, se puede observar cómo alrededor de donde se pusieron los extractos de el rosal, la salvia y el eucalipto no hay bacterias de B. Megaterium ya que esto confirmaría que tienen alguna actividad antimicrobiana frente a esta bacteria. También podemos observar que pasa lo mismo con el perejil, el rosal y el eucalipto frente a la bacteria E. Coli. Sin embargo, la salvia es la que posiblemente tenga mayor actividad antimicrobiana frente a la bacteria B. Megaterium ya que se puede observar como las bacterias desaparecen en mayor cantidad en la muestra de salvia, por lo que sería conveniente centrarnos más en ella. Respecto al resto de las placas, no se observan indicios de actividad antimicrobiana en las muestras no mencionadas. Podríamos realizar algún tipo de experimento enfrentando a la salvia con otro tipo de bacterias para así poder ver como progresa y si hay algún indicio de actividad antimicrobiana frente a diferentes bacterias y ver su eficacia.
ResponderEliminar
ResponderEliminarTras preparar varias placas con las bacterias B. Megaterium y E. Coli se introdujeron en estas placas discos empapados con extractos de las diferentes placas que seleccionamos y preparamos en clases anteriores. El objetivo de todo este proceso es exponer estos extractos de las plantas ante las bacterias para comprobar si tienen actividad antimicrobiana y si es así, en qué medida, esto lo comprobaremos si al observar la placa el disco con el extracto origina un halo donde la bacteria no florece, a mayor diámetro del halo mayor será su actividad. Dicho esto y tras observar las placas obtenemos los siguientes datos:
>Ante B. Megaterium:
Podemos observar como la salvia presenta una actividad muy clara y destacada, también el rosal y el eucalipto parece que actúan ante la bacteria y el Resto de plantas como madroño, olivo, ortiga... no tienen actividad apreciable al menos a simple vista
>Ante E. Coli:
A la salvia esta vez ni siquiera se le aprecia ninguna actividad, el rosal y el eucalipto en más o menos la misma medida presentan ese halo distintivo y, como con Bacilo, el resto de plantas no actúan.
Con estos datos mis propuestas son las siguientes: probar los discos en diferentes condiciones, sobre diferentes bacterias, he pensado que como el objetivo es aplicado a personas, investigar bacterias contraídas a través alimentos como Vibrio parahaemolyticus o Norovirus, o también bacterias transmitidas por animales como Psitacosis o la Bartonella henselae entre otros muchos ejemplos, por ultimo obviamente seguir probando otras plantas en busca de encontrar actividad antimicrobiana en alguna de ellas.
Espero que mi aportación haya sido útil y con ganas de ver como avanza este proyecto. Un saludo
SERGIO MOLINA
Sergio, tu aportación así como las de tus compañeros son todas interesantes y útiles. Ánimo y continúa así.
EliminarEn estas primeras placas no se puede ver que tengan una destacarle actividad antimicrobiana, exceptuando la Salvia en B.Megaterium, que muestra una circunferencia alrededor del disco impregnado de su aceite esencial. En el rosal y el Eucalipto también se puede distinguir una circunferencia parecida a la de la salvia, pero esta vez en E.Coli, aunque casi nada comparada con la Salvia.
ResponderEliminarPodemos tener esperanzas en las tres plantas nombradas anteriormente, pero tampoco tenemos porque desanimarnos con las demás, pues también podrían servirnos para romper los films con los que se protegen las bacterias.
Con las bacterias que nos han salido positivo en actividad antimicrobiana, podríamos usarlas como ejemplo o como puto de referencia e ir comparándolas con la demas plantas para una mejor evaluación.
Algunas plantas con las que hemos trabajado como el eucalipto o el perejil ya se sabe y hay artículos hablando de esa actividad antimicrobiana, por lo que si no se puede apreciar esa eliminación de bacterias es posible que la placa se halla contaminado o no hallamos realizado el experimento correctamente. Pero de la misma manera podríamos llevarnos una sorpresa con algún aceite esencial en especifico.
En el proyecto de investigación sobre la actividad antimicrobiana de algunas plantas que estamos llevando a cabo este año, después realizar los pasos ya descritos en la introducción, hemos obtenido los siguientes resultados:
ResponderEliminarEn la primeras tres placas que contienen Bacillus Megaterium, observamos como no existe casi actividad antimicrobiana a excepción de la salvia y del rosal.
Por el contrario, en las últimas tres placas que contienen E.Coli, solo se puede ver como solo el eucalipto y nuevamente el rosal, muestra actividad antimicrobiana.
En las demás plantas que hemos probado, no parece que tengan dicha actividad.
Con respecto a lo conocido sobre la actividad microbiana de las plantas anteriormente mencionadas:
-Salvia: sí presenta actividad antimicrobiana http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S0101-20612009000400010&script=sci_arttext&tlng=pt
-Rosal: si presenta actividad antimicrobiana https://www.fitoterapia.net/publicaciones/hemeroteca/rosa-silvestre-beneficios-actividad-antimicrobiana-1747.html
-Eucalipto: si presenta actividad antimicrobiana https://www.fitoterapia.net/publicaciones/hemeroteca/rosa-silvestre-beneficios-actividad-antimicrobiana-1747.html
En conclusión, yo creo que debemos investigar más a fondo la salvia, el eucalipto y, sobre todo, el rosal. A demás, en vez de dar por perdida la posible actividad antimicrobiana de las otras plantas, podemos probarlas con otras bacterias.
Nuria Barroso
En primer lugar pondré los resultados obtenido con la prueba con Bacillus megaterium y en segundo lugar los de Escherichia coli:
ResponderEliminar-Rosal:Un halo de pequeño tamaño/ Un halo de pequeño tamaño
-Eucalipto:Un halo más pequeño que el del rosal/ Un halo mayor que el del rosal
-Salvia: Un halo mayor/ Nada
-Santolina:Nada
-Peregil:Nada
-Madroño:Un pequeño halo/ Un pequeño halo
-Shiso:Nada/ Un pequeño halo
-Ortiga:Un pequeño halo/ Nada
-Naranja:Nada
-Limón:Nada
-Olivo:Un muy pequeño halo/ Nada
-Lavanda:Nada
Como conclusión hemos sacado que las plantas suelen tener más carácter antimicrobiano ante el Bacillus megaterium y tendriamos que centrarnos en investigar la salvia, el rosal y el eucalipto, que son los que mejores resultado han tenido.
En primer lugar pondré los resultados obtenido con la prueba con Bacillus megaterium y en segundo lugar los de Escherichia coli:
ResponderEliminar-Rosal:Un halo de pequeño tamaño/ Un halo de pequeño tamaño
-Eucalipto:Un halo más pequeño que el del rosal/ Un halo mayor que el del rosal
-Salvia: Un halo mayor/ Nada
-Santolina:Nada
-Peregil:Nada
-Madroño:Un pequeño halo/ Un pequeño halo
-Shiso:Nada/ Un pequeño halo
-Ortiga:Un pequeño halo/ Nada
-Naranja:Nada
-Limón:Nada
-Olivo:Un muy pequeño halo/ Nada
-Lavanda:Nada
Como conclusión hemos sacado que las plantas suelen tener más carácter antimicrobiano ante el Bacillus megaterium y tendriamos que centrarnos en investigar la salvia, el rosal y el eucalipto, que son los que mejores resultado han tenido.
Repito el comentario porque veo que se ha subido sin mi nombre.